產(chǎn)品基本信息

品牌與產(chǎn)地

品牌：伯樂（Bio-Rad Laboratories, Inc.），全球領(lǐng)先的生命科學(xué)與臨床診斷產(chǎn)品制造商。

產(chǎn)地：美國(guó)（原廠設(shè)計(jì)制造，核心高壓模塊與電路系統(tǒng)在美國(guó)加州赫拉克勒斯生產(chǎn)）。

核心功能

BD LSRFortessa X-50 是一款超高端臺(tái)式多色分析型流式細(xì)胞儀（High-Parameter Analyzer）。其核心功能是實(shí)現(xiàn)的多參數(shù)細(xì)胞表型與功能分析。它不具備物理分選（Sorting）能力，但專注于在單細(xì)胞水平上解析的復(fù)雜信息。主要功能包括：

1. 超高維數(shù)據(jù)分析：支持5激光系統(tǒng)，最多可同時(shí)檢測(cè)50個(gè)參數(shù)（2個(gè)散射光 + 48個(gè)熒光），能夠一次性描繪出細(xì)胞極其精細(xì)的“身份指紋”。

2. 深層次免疫表型：能夠同時(shí)分析數(shù)十種表面標(biāo)志物、趨化因子受體、活化狀態(tài)標(biāo)志物，用于發(fā)現(xiàn)新的細(xì)胞亞群（如組織駐留記憶T細(xì)胞、先天樣淋巴細(xì)胞）。

3. 全光譜流式（Spectral）兼容性：X-50型號(hào)是BD在傳統(tǒng)PMT（光電倍增管）技術(shù)上的巔峰之作，雖然本身是傳統(tǒng)流式，但其高通道數(shù)設(shè)計(jì)為與全光譜流式（如BD FACSDiscover S8）進(jìn)行數(shù)據(jù)比對(duì)和驗(yàn)證提供了基礎(chǔ)。

4. 高速高通量分析：分析速度可達(dá)100,000事件/秒，配合自動(dòng)進(jìn)樣器（HTS），可快速處理大量樣本，適用于大規(guī)模單細(xì)胞圖譜繪制（如Human Cell Atlas項(xiàng)目）。

技術(shù)特點(diǎn)

1. 模塊化光學(xué)系統(tǒng)（MOS）：這是LSRFortessa系列區(qū)別于FACSCanto的核心。光路不再是完全固定的，而是采用模塊化設(shè)計(jì)。用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，像搭積木一樣更換不同的濾光片和分光鏡（Dichroic Mirrors），從而自由定義每個(gè)檢測(cè)器的波長(zhǎng)范圍，最大化利用激光能量和熒光染料。

2. 5激光固態(tài)激發(fā)源：標(biāo)配或可選配5根高功率固態(tài)激光器，覆蓋從紫外到遠(yuǎn)紅外的全光譜范圍（355nm UV, 405nm Violet, 488nm Blue, 561nm Yellow-Green, 640nm Red）。這種配置確保了有足夠的“光學(xué)空間”來容納48種熒光染料而不發(fā)生嚴(yán)重的光譜重疊。

3. 高靈敏度PMT陣列：配備了多達(dá)30個(gè)獨(dú)立的高量子效率PMT檢測(cè)器。每個(gè)檢測(cè)器都經(jīng)過精密校準(zhǔn)，確保在檢測(cè)微弱信號(hào)（如轉(zhuǎn)錄因子、磷酸化蛋白）時(shí)具有極低的背景噪音。

4. 數(shù)字信號(hào)處理（DSP）：全數(shù)字化采集系統(tǒng)，支持脈沖寬度（Width）和高度（Height）分析，能有效去除粘連細(xì)胞（Doublets），確保單細(xì)胞數(shù)據(jù)的純凈度。

5. 自動(dòng)化液流控制：智能液流系統(tǒng)能自動(dòng)調(diào)節(jié)壓力以適應(yīng)不同粘度的樣本（如全血、組織消化液），并自動(dòng)進(jìn)行樣本間沖洗，將交叉污染率降至（<0.1%）。

應(yīng)用領(lǐng)域

• 高維免疫學(xué)（High-Dimensional Immunology）：細(xì)胞因子風(fēng)暴研究、腫瘤微環(huán)境（TME）免疫細(xì)胞浸潤(rùn)分析、自身免疫病機(jī)制探索。

• 單細(xì)胞多組學(xué)前端驗(yàn)證：作為單細(xì)胞RNA測(cè)序（scRNA-seq）或單細(xì)胞ATAC測(cè)序（scATAC-seq）的“金標(biāo)準(zhǔn)”驗(yàn)證工具，用于確認(rèn)分選群體的純度或驗(yàn)證測(cè)序發(fā)現(xiàn)的表面標(biāo)志物。

• 藥物研發(fā)與生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)：在抗體藥物篩選（ADC, BiTE）中，同時(shí)評(píng)估靶點(diǎn)表達(dá)、內(nèi)化效率、殺傷效應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)功能。

• 干細(xì)胞與發(fā)育生物學(xué)：多能性標(biāo)志物組合分析、譜系追蹤、罕見干細(xì)胞亞群鑒定。

產(chǎn)品圖片

https://www.bdbiosciences.com/dam/bdb/products/instruments/flow-cytometers/lsrfortessa/lsrfortessa-01.png.thumb.1280.1280.png

（圖示：儀器體積較大，通常配備雙顯示器，正面有自動(dòng)進(jìn)樣器托盤，側(cè)面有模塊化光學(xué)艙門）

產(chǎn)品參數(shù)

詳細(xì)參數(shù)

注意事項(xiàng)

1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)復(fù)雜性：30色實(shí)驗(yàn)不是簡(jiǎn)單的染料疊加。必須進(jìn)行嚴(yán)格的光譜重疊矩陣（Spillover Spreading Matrix, SSM） 計(jì)算。在購買前，實(shí)驗(yàn)室必須配備精通流式配色原理（如Fluorochrome Spectra Viewer工具）的專家，否則大量通道的串色（Spillover）會(huì)導(dǎo)致數(shù)據(jù)無法解讀。

2. 樣本制備要求極高：30色抗體染色對(duì)樣本的潔凈度、細(xì)胞活性、非特異性結(jié)合（Fc Blocking）要求極為苛刻。任何微小的死細(xì)胞或碎片都會(huì)在30個(gè)通道中產(chǎn)生巨大的背景噪音。必須使用高濃度的活力染料（如Live/Dead Fixable染料）和徹底的洗滌步驟。

3. 開機(jī)校準(zhǔn)耗時(shí)：雖然儀器穩(wěn)定，但5激光30色配置的開機(jī)預(yù)熱和CS&T（Cytometer Setup and Tracking）質(zhì)控流程比普通儀器長(zhǎng)（約30-45分鐘）。每日必須運(yùn)行質(zhì)控微球以驗(yàn)證所有30個(gè)檢測(cè)器的性能。

4. 維護(hù)成本：30個(gè)PMT和5根激光器的維護(hù)成本遠(yuǎn)高于普通3激光儀器。紫外激光器（355nm）壽命相對(duì)較短（約5,000-8,000小時(shí)），更換費(fèi)用昂貴。

5. 數(shù)據(jù)存儲(chǔ)壓力：一個(gè)30色的FCS文件體積巨大（通常50-100MB/樣本），對(duì)電腦硬盤（建議SSD）和服務(wù)器備份空間提出了極高要求。

應(yīng)用與建議

購買建議

• 強(qiáng)烈推薦購買場(chǎng)景（必選X-50）：

  • 科研機(jī)構(gòu)或國(guó)家實(shí)驗(yàn)室：致力于繪制人類細(xì)胞圖譜（Human Cell Atlas）或進(jìn)行系統(tǒng)免疫學(xué)（Systems Immunology）研究。

  • 腫瘤免疫學(xué)中心：需要同時(shí)分析腫瘤細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、髓系細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞等超過15種細(xì)胞類型的復(fù)雜相互作用。

  • 核心設(shè)施共享平臺(tái)（作為旗艦機(jī)）：需要一臺(tái)“鎮(zhèn)場(chǎng)之寶”來滿足PI們最前沿的多色實(shí)驗(yàn)需求，與分選儀（如FACSAria）和光譜儀（如FACSDiscover）形成技術(shù)互補(bǔ)。

• 可考慮低配版（如X-20）場(chǎng)景：

  • 主要做20色以內(nèi)的實(shí)驗(yàn)，且預(yù)算有限。X-20（4激光20色）性價(jià)比更高。

  • 實(shí)驗(yàn)室已有光譜流式細(xì)胞儀，購買LSRFortessa僅作為傳統(tǒng)流式的對(duì)照和驗(yàn)證平臺(tái)。

• 不推薦購買場(chǎng)景：

  • 臨床常規(guī)檢測(cè)：醫(yī)院檢驗(yàn)科做TBNK或白血病分型，完全不需要30色，購買FACSCanto II或CytoFLEX更經(jīng)濟(jì)實(shí)用。

  • 新手實(shí)驗(yàn)室：沒有流式專家坐鎮(zhèn)，購買此儀器等于“大炮打蚊子”，且極易因操作不當(dāng)導(dǎo)致光路損壞或數(shù)據(jù)混亂。

價(jià)格標(biāo)準(zhǔn)

• 全新機(jī)市場(chǎng)參考價(jià)（2026年，中國(guó)含稅）：人民幣 450萬元 - 650萬元。

  • 價(jià)格波動(dòng)極大，完全取決于激光器和檢測(cè)器的數(shù)量：

    • 基礎(chǔ)配置（3激光10色）：約180萬-250萬（但通常不會(huì)這樣買LSRFortessa）。

    • 標(biāo)準(zhǔn)高配（5激光20-25色）：約350萬-480萬。

    • 頂配（5激光30色，含高功率UV激光和全自動(dòng)進(jìn)樣器）：約550萬-650萬。

• 二手/翻新機(jī)價(jià)格：極其罕見，且風(fēng)險(xiǎn)高。若有，價(jià)格約200萬-300萬元（需第三方工程師全面檢測(cè)UV激光器壽命）。

服務(wù)與保障

• 標(biāo)準(zhǔn)保修：1年現(xiàn)場(chǎng)全保（On-site Comprehensive Warranty）。BD工程師上門安裝、調(diào)試復(fù)雜的MOS光路模塊，并提供高級(jí)應(yīng)用培訓(xùn)（多色配色設(shè)計(jì)）。

• 必須購買的延保：BD Care Platinum Program（白金計(jì)劃）。對(duì)于X-50這種復(fù)雜儀器，強(qiáng)烈建議購買5年延保。價(jià)格約為儀器總價(jià)的12%-18%/年。包含：

  • 每季度1次預(yù)防性維護(hù)（PM）：清潔光學(xué)模塊，檢查激光器功率衰減。

  • 7x24小時(shí)緊急響應(yīng)：備件庫中常備昂貴的UV激光模塊。

  • 性能優(yōu)化服務(wù)：定期幫助用戶重新優(yōu)化濾光片配置以適應(yīng)新的染料面板。

• 軟件支持：FACSDiva軟件支持復(fù)雜的光路配置（Cytometer Configuration），保修期內(nèi)免費(fèi)升級(jí)。

使用說明書

BD LSRFortessa的操作高度依賴FACSDiva軟件，其硬件手冊(cè)極為復(fù)雜。以下為針對(duì)30色實(shí)驗(yàn)的特殊操作要點(diǎn)示意圖：

BD LSRFortessa X-50 30色實(shí)驗(yàn)操作核心流程

[實(shí)驗(yàn)前 - 配色設(shè)計(jì)（必須在軟件外完成）]
1. 使用BD Fluorescence Spectrum Viewer在線工具 -> 2. 選擇5激光30色 -> 3. 分配染料，確保每個(gè)染料在檢測(cè)器上的信號(hào)，串色最小 -> 4. 導(dǎo)出配色表（Template）

[每日開機(jī) - 長(zhǎng)流程]
1. 開啟激光器（提前30分鐘預(yù)熱，特別是UV激光） -> 2. 運(yùn)行CS&T微球 -> 3. 軟件自動(dòng)生成30個(gè)通道的Voltage Target值 -> 4. 運(yùn)行補(bǔ)償微球（如UltraComp eBeads） -> 5. 在Diva中建立30x30的補(bǔ)償矩陣（Comp Matrix）并保存

[上樣檢測(cè)]
1. 加載配色模板 -> 2. 使用低流速預(yù)覽樣本，檢查所有通道是否有信號(hào) -> 3. 切換到高流速采集 -> 4. 實(shí)時(shí)監(jiān)控“Spillover Spreading”指標(biāo)，若某個(gè)通道溢出過大，需中止實(shí)驗(yàn)調(diào)整配色

[關(guān)機(jī)]
1. 運(yùn)行“Shutdown”程序（含去離子水沖洗和消毒液浸泡） -> 2. 務(wù)必關(guān)閉UV激光器電源（以延長(zhǎng)壽命） -> 3. 關(guān)閉主機(jī)

注：完整的使用說明書是一套包含《硬件安裝指南》、《MOS配置手冊(cè)》、《FACSDiva高級(jí)操作手冊(cè)》的文檔集，需從BD官網(wǎng)下載或向工程師索要。